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        荧光分光光度法在克拉维酸聚合物 及其他荧光杂质含量测定上的应用

        日期: 2019-04-24
        浏览次数: 340
        案例名称: 荧光分光光度法在克拉维酸聚合物 及其他荧光杂质含量测定上的应用

        荧光分光光度法在克拉维酸聚合物

        及其他荧光杂质含量测定上的应用

        天津港东科技股份有限公司? 应用分析部

        摘要:

        阿莫西林克拉维酸钾为阿莫西林与克拉维酸的复方制剂,前者是广谱青霉素但不耐青霉素酶,后者为β-内酰胺酶抑制剂,具有广谱抑酶作用bbin体育,合用可提高阿莫西林抗产酶耐药菌的作用bbin体育,因此研究阿莫西林克拉维酸钾片中克拉维酸聚合物及其他荧光杂质含量具有实际意义。

        本文以测定阿莫西林克拉维酸钾片(2:1)中克拉维酸钾及其他荧光杂质含量为例,依据《阿莫西林克拉维酸钾片(2:1)一致性评价质量标准》,应用港东F-280型荧光分光光度计对拉维酸钾及其他荧光杂质含量进行测定bbin体育。结果证明此方法操作简便,结果准确bbin体育。

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        关键词:阿莫西林克拉维酸钾片(2:1);克拉维酸钾及其他荧光杂质;分子荧光

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        一、原理:

        样品经溶解后调节pH至5.0,其中克拉维酸聚合物和其他荧光杂质已经形成了稳定的聚合物,过滤后,用分子荧光分光光度计检测其在激发波长365nm、发射波长440nm处的荧光强度,以此计算克拉维酸聚合物及其他荧光杂质在阿莫西林克拉维酸钾片中所占比例。

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        二、实验条件:

        1、仪器及附件:

        ?? 天津港东 F-280型荧光分光光度计????? ?1台

        ?? 荧光石英比色皿??? ???????????????????2个

        ?? 超声波清洗机? ???????????????????????1台

        2、分析条件:

        激发波长:365nm

        发射波长:440nm

        3bbin体育、药品试剂:

        ??? 氢氧化钠(分析纯)bbin体育、磷酸二氢钠(分析纯)、硫酸奎宁(分析纯)、硫酸(分析纯)、蒸馏水。

        4、溶液配制:

        (1)氢氧化钠溶液(1mol/L)

        精密称取4.0000g氢氧化钠粉末置于100ml小烧杯中,取少量的蒸馏水将其溶解,转移至100ml容量瓶内bbin体育bbin体育,用蒸馏水定容bbin体育。

        (2)磷酸二氢钠溶液(0.1mol/L)

        精密称取3.9000g磷酸二氢钠粉末(NaH2PO4·2H2O分子量156)置于100ml小烧杯中bbin体育,取少量的蒸馏水将其溶解,转移至250ml容量瓶内,用蒸馏水定容bbin体育。

        (3)硫酸溶液(0.5mol/L)

        用移液管量取13.5ml浓硫酸置于放有少量蒸馏水的100ml小烧杯中,待其放热结束,转移至500ml容量瓶内,用蒸馏水定容bbin体育。

        (4)硫酸奎宁对照品溶液(0.42μg/ml)

        ① 硫酸奎宁溶液(5000μg/ml)

        精密称取0.2500g硫酸奎宁粉末置于100ml小烧杯中,取少量的0.5mol/L硫酸溶液将其溶解,转移至50ml容量瓶内,用0.5mol/L硫酸溶液定容bbin体育。

        ② 硫酸奎宁溶液(50μg/ml)

        用移液管量取1ml 5000μg/ml硫酸奎宁溶液bbin体育,置于100ml容量瓶中,用0.5mol/L硫酸溶液定容。

        ③ 硫酸奎宁对照品溶液(0.42μg/ml)

        用移液管量取0.84ml 50μg /ml硫酸奎宁溶液,置于100ml容量瓶中bbin体育,用0.5mol/L硫酸溶液定容bbin体育。

        (5)供试品溶液(1mg/ml)

        取本品若干颗,置于玛瑙研钵中研磨成细粉,过100目筛子,混匀,取筛出的细粉适量,精密称取0.1500g(本品中阿莫西林与克拉维酸钾的质量比为2:1,所称取细粉应约含克拉维酸钾25mg),置于100ml小烧杯中,取少量的0.1mol/L磷酸二氢钠溶液将其溶解,转移至50ml容量瓶中,用0.1mol/L磷酸二氢钠溶液定容bbin体育bbin体育,用漏斗进行过滤,取其滤液。

        5、其它:

        分析天平(0.0001g)、玛瑙研钵bbin体育、100目筛子、称量纸若干、pH试纸(pH1~14)bbin体育、50ml容量瓶、250ml容量瓶、500ml容量瓶、100ml容量瓶bbin体育、1ml移液管、5ml移液管、10ml移液管、10ml具塞刻度试管bbin体育、比色管架、漏斗bbin体育、100ml小烧杯、玻璃棒若干bbin体育、擦镜纸等。

        三bbin体育、实验方法

        1、供试品样品制备


        ?荧光分光光度法在克拉维酸聚合物 及其他荧光杂质含量测定上的应用


        2、对照品样品制备 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ??

        荧光分光光度法在克拉维酸聚合物 及其他荧光杂质含量测定上的应用

        3、空白溶液制备

        供试品空白溶液:0.1mol/L磷酸二氢钠溶液(pH=5.0)bbin体育。

        对照品空白溶液:0.5mol/L硫酸溶液。

        四bbin体育、测定结果

        应用港东F-280型荧光分光光度计的“波长扫描”?bbin体育??bbin体育,分别读取待测溶液的荧光强度bbin体育,根据计算公式得到化妆品样品中总硒的含量。

        ??? 仪器设置参数:

        激发波长

        365nm

        发射起始波长

        200nm

        激发狭缝

        10.0nm

        PMT电压

        400V

        发射终止波长

        760nm

        发射狭缝

        10.0nm

        扫描速度

        1200nm/min

        灵敏度

        0.1s

        增益

        1

        以下为港东F-280型荧光分光光度计测定阿莫西林克拉维酸钾片(2:1)中克拉维酸聚合物及杂质的发射谱图和计算样品中克拉维酸聚合物及杂质含量的计算公式。

        ?? 波长扫描测试谱图:

        荧光分光光度法在克拉维酸聚合物 及其他荧光杂质含量测定上的应用


        注:红色谱图为供试品参比溶液;黑色谱图为对照品参比溶液;蓝色谱图为对照品溶液;绿色谱图为供试品溶液。

        ?? 计算公式:

        荧光分光光度法在克拉维酸聚合物 及其他荧光杂质含量测定上的应用


        式中:Fx为供试品溶液荧光强度;

        ????? Fs为硫酸奎宁对照品溶液荧光强度;

        ????? Cx为供试品溶液中克拉维酸的浓度,mg/mL;

        ????? Cs为对照品溶液中硫酸奎宁的浓度,μg/mL;

        ????? 0.42为对照品溶液中硫酸奎宁的理论浓度,μg/mL。

        本实验标准样品中克拉维酸聚合物及其他荧光杂质含量为5%bbin体育,样品1中克拉维酸聚合物及其他荧光杂质含量为0.606%,样品2中克拉维酸聚合物及其他荧光杂质含量为0.567%,未超过标准样品中的铝盐含量,故检测合格。

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        五、结论

        根据《阿莫新林克拉维酸钾片(2:1)一致性评价质量标准》所述方法,进行样品测试,实验结果表明,供试品溶液的荧光强度(Fx)小于对照品溶液的荧光强度(Fs)(5%w/w,以克拉维酸含量计算)bbin体育,故符合阿莫新林克拉维酸钾片(2:1)一致性评价质量标准。

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